ATAC测序
简介
ATAC-seq (Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high throughput Sequencing) 是使用高通量测序对 Tn5 转座酶可接近的核染色质区域进行测序分析的一种研究技术。该技术由美国斯坦福大学的研究人员开发,2013 年首次发表在 Nature Methods (Buenrostro et al., 2013)。通过转座酶对特定时空下开放的核染色质区域进行切割,获得在该时空下基因组中所有活跃转录的调控序列。
ATAC-seq 技术可以进行样本之间差异的染色质开放位点的比较,通常并不单独使用。作为检测表观遗传-染色质开放状态现象的方式,与样本基因表达谱紧密相连,从靶标基因的表观状态关联到表达水平,具有强大的数据挖掘作用。此外,通过关联基因组、外显子,染色质免疫共沉淀(组蛋白修饰或转录因子结合)测序信息,形成表观调控-基因组-基因表达的完整调控链。
项目优势
- 灵敏性高:低细胞起始量(500-50000个);
- 操作简单:两步法,耗时短;
- 实验重复性好:技术重复间表现出非常好的可重复性( R = 0.98),并与DHs测序数据间也有着较好的一致性(R>79);
- 能同时揭示开放染色质的基因组位置,DNA结合蛋白,转录结合位点的相互作用。
技术路线
- 单细胞悬液制备
- 转座反应与纯化
- PCR扩增
- 定量与质控
- illumina平台测序
数据分析
服务周期
45天
结果展示
使用 R 包 ATACseqQC绘制样本的插入片段长度统计图,根据图中插入片段长度的富集位置可以初步评估文库质量。
根据比对结果,使用 deeptools[8] 软件绘制测序数据在 TSS ± 3Kb 附近的信号强度。